流感病毒nsl基因的克隆及其原核表达载体的构建

来源 :中国病毒学 | 被引量 : 0次 | 上传用户：Bo_Gao

【摘要】

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为了解H5N1亚型流感病毒株的nsl基因特性及其规模制备NSl蛋白，首先将病毒在鸡胚中传代，从收获的尿囊液中提取RNA，采用RT-PCR技术扩增流感病毒全长ns基因。测序显示H5N1亚型流感

【作者】

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张志珍洪文珊李康生

【机构】

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山西大学生命科学与技术学院,汕头大学医学院．香港大学医学院联合流感研究中心

【出处】

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中国病毒学

【发表日期】

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2004年5期

【关键词】

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流感病毒 nsl基因序列分析:克隆诱导表达 Avian influenzaAvirus ns1 gene Sequence analysis Cloning

【基金项目】

：

世界卫生组织资助项目(HQ/01/144185),,中国博士后科学基金(2003034460)

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为了解H5N1亚型流感病毒株的nsl基因特性及其规模制备NSl蛋白，首先将病毒在鸡胚中传代，从收获的尿囊液中提取RNA，采用RT-PCR技术扩增流感病毒全长ns基因。测序显示H5N1亚型流感病毒NSlcDNA全长678bp，编码225个氨基酸。BLAST分析表明，Qa/ST／852，01(H5N1)病毒株nsl基因与近年来从华南地区分离的禽H5N1毒株的nsl基因有很高的同源性。之后采用PCR方法扩增nsl基因的cDNA片段，将其克隆到pGEX-4T-3载体中，与谷胱甘肽巯基转移酶(GST)基因融合，构建

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