【摘 要】
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目的 研究不同浓度牙龈卟啉单胞菌脂多糖(Porphyromonas gingivalis lipopolysaccharide,P.g LPS)对大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMMSCs)增殖
【机 构】
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南京大学医学院附属口腔医院,南京市口腔医院牙周病科,江苏南京210008;南京大学医学院附属口腔医院,南京市口腔医院口腔中心实验室,江苏南京210008;南京大学医学院附属口腔医院,南京市口腔医院牙周
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目的 研究不同浓度牙龈卟啉单胞菌脂多糖(Porphyromonas gingivalis lipopolysaccharide,P.g LPS)对大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMMSCs)增殖、炎症因子分泌能力和成骨分化的影响.方法 使用不同质量浓度P.g LPS(1.0、2.5、5.0、10.0 μg/mL)刺激大鼠BMMSCs,记为P.g LPS组;同时设立对照组,即不使用P.g LPS培养的大鼠BMMSCs.利用CCK-8法检测细胞增殖活性;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和酶联免疫吸附实验(ELISA)分别检测细胞内和上清液中肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor-a,TNF-α)和白细胞介素10(interleukin-10,IL-10)的表达;qRT-PCR和碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)染色分别检测成骨诱导早期的成骨分化情况.结果 P.gLPS刺激1、3、5d后,各组细胞增殖活性差异不明显(均P＞0.05);P.gLPS刺激3d后,各质量浓度P.gLPS组相较于对照组中TNF-α及IL-10的mRNA表达水平均升高;成骨诱导4、7d后,各质量浓度P.g LPS组相较于对照组中成骨分化相关因子ALP、Runt相关转录因子2(Runt-related transcription factor2,Runx2)和Ⅰ型胶原(collagen type Ⅰ,COL-Ⅰ)的表达水平均受到抑制(均P＜0.05);成骨诱导7 d后,5.0、10.0 μg/mL P.g LPS组ALP活性明显低于对照组,1.0、2.5 μg/mL P.g LPS组ALP活性相比于对照组差异不明显.结论 P.gLPS对BMMSCs的增殖无明显影响,但可增加BMMSCs中炎症因子的表达水平,并影响其成骨分化.
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