研究微小核糖核酸-146a(miRNA-146a)对寻常型银屑病患者外周血CD4+ T淋巴细胞的调控,并探讨miRNA-146a在寻常型银屑病发病中的作用。
方法收集寻常型银屑病患者30例和正常对照20例。采用实时定量PCR检测外周血CD4+ T淋巴细胞miRNA-146a表达水平;免疫磁珠法分选外周血CD4+T淋巴细胞,将分离的细胞分为对照组、miRNA-146a组和miRNA-146a抑制物组,进行细胞培养,流式细胞术检测Th1和Th2数量;蛋白免疫印迹法和实时定量PCR分别检测IFN-γ受体α(IFN-γRα)、T细胞表达T盒(T-bet)、鸟嘌呤腺嘌呤胸腺嘧啶腺嘌呤序列结合蛋白-3(GATA-3)蛋白和mRNA的表达;酶联免疫吸附试验检测血浆和体外细胞培养上清液IFN-γ、白细胞介素(IL)-4表达水平。
结果寻常型银屑病患者外周血CD4+ T淋巴细胞miRNA-146a与血浆IFN-γ表达较正常对照组升高[(2.43±0.94)vs(1.05±0.23),(27.69±7.64)ng/L vs(9.75±2.81)ng/L],差异均有统计学意义(t值分别为6.651和4.237,P均<0.01),且miRNA-146a的表达与血清IFN-γ呈正相关(r=0.837,P<0.01)。体外CD4+T淋巴细胞培养结果显示,与对照组比较,miRNA-146a组Th1数量、T-bet蛋白和mRNA表达、培养液上清IFN-γ水平显著增加,IFN-γRα蛋白表达降低,差异均有统计学意义(P均<0.01);Th2数量、GATA-3蛋白、GATA-3和IFN-γRα的mRNA表达及培养液上清IL-4水平无明显改变(P均>0.05);miRNA-146a抑制物可有效地阻断miRNA-146a对Th1细胞的调控作用。
结论miRNA-146a通过影响Th1细胞的分化和功能参与对寻常型银屑病患者外周血CD4+T淋巴细胞的调控,在寻常型银屑病发病过程中可能发挥着一定的作用。