重组pcDNA 3.0-WWOX构建对胆囊癌细胞表达及△Ψm的影响

来源 :昆明医科大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：jianghulong007

【摘要】

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目的体外构建及鉴定Pc DNA3.0-WWOX真核表达载体,探讨过表达WWOX对人胆囊癌细胞WWOXm RNA表达、蛋白表达及跨膜电位（△Ψm）的影响.方法提取人胆囊癌细胞总RNA,RT-PCR反应合成WW

【作者】

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魏东杨珮吴雪松戈佳云施智甜王琳邹浩张小文

【机构】

：

昆明医科大学第二附属医院肝胆胰外科,曲靖市第二人民医院胃肠外科,昆明医科大学第二附属医院胃肠外科

【出处】

：

昆明医科大学学报

【发表日期】

：

2016年4期

【关键词】

：

抑癌基因WWOX 胆囊癌细胞转染过表达跨膜电位 Tumor suppressor gene WWOX Gallbladder cancer cell

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目的体外构建及鉴定Pc DNA3.0-WWOX真核表达载体,探讨过表达WWOX对人胆囊癌细胞WWOXm RNA表达、蛋白表达及跨膜电位（△Ψm）的影响.方法提取人胆囊癌细胞总RNA,RT-PCR反应合成WWOX的c DNA,PCR产物回收纯化.目的基因WWOX和pc DNA3.0载体经限制性内切酶ECORⅠ和XhoⅠ酶切,将双酶切WWOX片段与pc DNA 3.0载体在T4 DNA连接酶的作用下进行连接重组.pc DNA 3.0-WWOX重组质粒转化后,提取质粒经双酶切鉴定及测序鉴定.将pc DNA 3.

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