【摘 要】
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目的 探讨白杨素在体内外对人结肠癌HCT-116细胞侵袭与转移作用及相关机制.方法 本实验应用CCK-8法检测白杨素对HCT-116细胞增殖能力的抑制作用.利用划痕和Transwell法检测白
【机 构】
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南京医科大学附属南京医院,南京市第一医院药学部,南京210006
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目的 探讨白杨素在体内外对人结肠癌HCT-116细胞侵袭与转移作用及相关机制.方法 本实验应用CCK-8法检测白杨素对HCT-116细胞增殖能力的抑制作用.利用划痕和Transwell法检测白杨素干预HCT-116细胞后对细胞迁移和侵袭能力的作用.通过Western blot检测白杨素干预后对HCT-116细胞中上皮间质转化(EMT)相关蛋白E-cadherin、N-cadherin、Vimentin和Snail表达水平的影响,并检测白杨素对HCT-116细胞内Yes相关蛋白(YAP)蛋白表达的作用.利用siRNA干扰实验考察YAP低表达对白杨素在HCT-116细胞侵袭作用和EMT进程中的影响.构建体内实验性肺转移模型考察白杨素对HCT-116细胞体内转移的作用.结果 白杨素从8 μmol·L-1开始能够显著抑制HCT-116细胞的增殖,8 μmol·L-1以下对HCT-116细胞增殖没有显著抑制作用.划痕和Transwell实验显示,白杨素(1、2和4 pnol·L—1)能够剂量依赖性的抑制HCT-116细胞的迁移与侵袭.Western blot结果显示,白杨素能够上调E-cadherin的蛋白表达,下调N-cadherin,Vimentin及转录因子Snail的蛋白表达.同时还发现白杨素能够下调YAP蛋白表达水平,而利用siRNA下调YAP后能显著逆转白杨素对HCT-116细胞迁移与侵袭的抑制作用,并能逆转白杨素对HCT-116细胞EMT过程的促进作用.体内肺转移实验显示,白杨素显著抑制了HCT-116在肺上转移结节.结论 本实验表明,白杨素能够在体内外抑制人结肠癌HCT-116细胞的侵袭与转移能力,其作用机制与抑制YAP的蛋白表达,下调EMT过程相关.
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