【摘 要】
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目的:在无血清培养条件下,使用富血小板纤维蛋白提取液(platelet-rich fibrin extract,PRFe)对人牙髓干细胞(human dental pulp stem cells,hDPSCs)增殖及分化的影响。方法:
【机 构】
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安徽医科大学口腔医学院,安徽安科生物工程(集团)股份有限公司
【基金项目】
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安徽省教育厅自然科学重大项目(编号:KJ2017ZD17);安徽医科大学安科生物校企合作项目(编号:K2015011);安徽省教育厅2015级研究生"千人培养计划"
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目的:在无血清培养条件下,使用富血小板纤维蛋白提取液(platelet-rich fibrin extract,PRFe)对人牙髓干细胞(human dental pulp stem cells,hDPSCs)增殖及分化的影响。方法:从健康志愿者的阻生齿中分离培养hDPSCs,经细胞形态和流式细胞技术对其鉴定。实验组中使用含PRFe不含胎牛血清(fetal bovine serum,FBS)的α-最低必须培养基(α-minimal essential medium,α-MEM),对照组中使用含10%FBS的α-MEM。噻唑蓝(methyl thiazol tetrazolium,MTT)法检测培养1~7d的细胞增殖情况。成骨能力的测定采用碱性磷酸酶染色,实时荧光定量聚合酶链式反应(real time quantitive-polymerase chain reaction,RT-PCR)检测碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)、骨钙蛋白(osteocalcin,OCN)、骨形态发生蛋白-2(bone morphogenetic protein-2,BMP-2)和runt相关转录因子2(runt-related transcription factor-2,RUNX-2)的表达。结果:hDPSCs高表达CD44、CD90和CD105,低表达CD34和CD45。两种培养基培养细胞形态相似,实验组的细胞形态更为纤长。随着诱导时间的增加,两组的成骨分化能力均上调(P<0.05),实验组成骨分化能力强于对照组(P<0.05)。结论:适宜浓度PRFe能够维持hDPSCs增殖分化。
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