论文部分内容阅读
目的 研究慢病毒介导的解整合素和金属蛋白酶(ADAM)8基因沉默对人胃癌MKN45细胞上皮间质转化(EMT)、侵袭和迁移能力的影响.方法 采用慢病毒转染技术沉默MKN45细胞中ADAM8基因,构建稳定沉默ADAM8的MKN45细胞株,转染空载作为阴性对照组(sh-NC组),转染ADAM8 shRNA为实验组(sh-ADAM8组),同时设置空白对照组(Blank组).Real-time PCR和Western印迹检测ADAM8的表达情况,Western印迹检测MKN45细胞中E-钙粘蛋白(E-cadher-in)、波形蛋白(Vimentin)和N-cadherin的表达水平;Transwell实验和划痕实验分别检测沉默ADAM8对MKN45细胞侵袭和迁移能力的影响.结果 慢病毒转染ADAM8 shRNA后,MKN45细胞中ADAM8 mRNA和蛋白表达水平均明显降低(P<0.05),提示已成功构建稳定沉默ADAM8基因的MKN45细胞株.与sh-NC组相比,sh-ADAM8组MKN45细胞中E-cadherin蛋白表达水平明显上调(P<0.05),Vimentin和N-cadherin蛋白表达水平明显下调(P<0.05),侵袭细胞数明显减少(P<0.05),细胞迁移率明显降低(P0.05).结论 ADAM8基因沉默能够抑制胃癌MKN45细胞EMT、侵袭和迁移.