一磷酸腺苷与肌动球蛋白相互作用的荧光光谱研究

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目的:采用荧光分光光度法研究了一磷酸腺苷(adenosine 5-monophosphate,AMP)与肌动球蛋白相互作用的情况.方法:根据分子间的相互作用力与相关热力学参数间的关系,结合AMP与肌动球蛋白相互作用的焓变和熵变,讨论AMP对肌动球蛋白荧光的猝灭机理,测定AMP与肌动球蛋白的猝灭常数、结合常数和作用力类型,考察AMP对肌动球蛋白构象的影响.结果:West blotting证明了不同浓度AMP对肌动球蛋白解离的促进作用;AMP与肌动球蛋白结合反应中△G<0,△H>0,△S>0,两者之间结合主要通过疏水相互作用,且AMP的存在使得肌动球蛋白的构象发生变化,疏水环境极性降低;荧光光谱分析表明AMP与肌动球蛋白的结合使肌动球蛋白内源荧光发生了有规律的猝灭,298 K和313 K温度条件下AMP与肌动球蛋白的静态猝灭常数分别为8.70×102、4.07×102 L/mol,结合常数KLB分别为9.253×102 L/mol和3.142×102 L/mol.结论:AMP通过疏水相互作月力和肌动球蛋白形成复合物,从而促进肌动球蛋白的解离.
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