靶向LOX-1基因RNAi慢病毒载体的构建及鉴定

来源 :中国细胞生物学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:FUHENGBIN
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该研究针对LOX-1基因(OLR1)设计并合成3条siRNA干扰序列,与双酶切的U6-vshR-NA-CMV-GFP慢病毒载体连接得到重组载体,包装慢病毒并测定滴度。采用最佳MOI值及转染条件,转染人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells, HUVEC),转染96h后通过RT-PCR和Western blot检测LOX-1 mRNA及蛋白的表达,流式细胞仪检测转染后ox-LDL诱导HUVEC的凋亡情况。测序证实靶向LOX-1RNAi慢病毒载体构建成功:
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