RNA干扰对流感病毒NP和PA基因表达及病毒增殖的抑制

来源 :第四军医大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:abuqifuni
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目的:应用RNA干扰技术(RNAi)研究针对流感病毒NP或/和PA基因的siRNA抑制NP或/和PA基因的表达及抑制流感病毒在MDCK细胞中的增殖.方法:分别构建针对NP,PA及同时干扰NP和PA的三种siRNA表达质粒pEG-FP/NP,pGenesil/PA和pEGFP/NP+PA,转染MDCK后,H5N1亚型流感病毒感染细胞,荧光显微镜判断转染效率,蛋白质印迹和半定量RT-PCR检测NP及PA蛋白表达及基因转录水平的变化,并在不同时间点检测细胞培养上清中的血凝值(HA),观察siRNA抑制流感病毒增
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