人胰岛素原基因B10位定点突变对增强胰外表达效率的实验研究

来源 :中国生物工程杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:a419132258
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目的构建在肝细胞内增强表达成熟人胰岛素的生理调控性人胰岛素原基因重组质粒.方法利用PCR定点突变技术在B-C及C-A连接处已两点突变的人胰岛素原基因上进行B10位突变,并在其上游连接肝细胞特异的3倍体葡萄糖反映元件(GLRE3)和胰岛素样生长因子结合蛋白-1启动子(IGFBP-1P).经酶切后将含有调控元件的3点突变人胰岛素原基因(GLRE3-IGFBP-1P-3mINS)插入逆转录病毒载体(pLXSN),脂质体介导转染大鼠肝癌细胞CBRH7919后检测成熟胰岛素表达情况及与含有调控元件的2点突变人胰岛素
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