内蒙古绒山羊毛囊兴盛期皮肤cDNA文库的构建及KAP6-2 cDNA的克隆

来源 :动物学研究 | 被引量 : 0次 | 上传用户:hnbc2008
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用SMART技术构建了绒山羊(Capra hircus)毛囊兴盛期皮肤组织的cDNA质粒文库.Trizol Reagent(GIBCO/BRL)分离RNA后,用Oligotex(QIAGEN)提取mRNA;以锚定引物反转录合成cDNA第一链作为模板,以2个锚定引物,用长链PCR扩增全长cDNA双链.CHROMA SPIN-400去除小片段后用SfiⅠ酶切,连接到SfiⅠ消化的pBluescript Ⅱ SK(带有 SfiⅠA和B两个位点)质粒载体中,转化E.coli 5α,库容量为1.8×105
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