PMP柱前衍生化HPLC法测定野生与移栽滇重楼多糖的单糖组成

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目的建立同时测定滇重楼多糖中5种单糖组分的方法。方法采用1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)柱前衍生化试剂,结合反相高效液相色谱(HPLC)法测定滇重楼多糖中5种单糖组分,色谱柱为Agela MP-C18(2)柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为乙腈-pH 6.70磷酸盐缓冲液(19∶81,V∶V),检测波长为250 nm,柱温为30℃,流速为1.0 mL·min-1。并对其测定结果进行独立样本t检验、主成分分析和聚类分析。结果滇重楼多糖最佳的水解条件为110℃,2 mol·L-1三氟乙酸(TFA),水解6 h。基于HPLC法所建立的单糖检测方法,5种单糖成分在各自线性范围内线性关系良好(r≥0.999 3),加样回收率为92.38%~99.98%。滇重楼多糖主要是由葡萄糖、甘露糖、半乳糖、鼠李糖和阿拉伯糖组成,且野生品葡萄糖、甘露糖、半乳糖、鼠李糖、阿拉伯糖的摩尔比为219.22∶28.23∶1.83∶1.44∶1.00。而移栽品的摩尔比为243.29∶17.85∶3.41∶1.00∶2.02。结论该试验所建立的方法操作简便、重复性和准确度高,适用于滇重楼的单糖成分的含量测定。不同产地的野生和移栽滇重楼在单糖组成方面无明显差异,初步认为移栽滇重楼可代替野生滇重楼入药。
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