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目的
探讨活化蛋白-1(AP-1)对17β雌二醇(E2)诱导L-02人正常肝细胞中胆盐输出泵(BSEP)、钠-牛磺胆酸盐共转运多肽(NTCP)表达的影响。
方法培养雌激素诱导的人肝细胞,联合AP-1的RNA干扰技术、Real-time PCR及Western blotting等方法,确定AP-1对雌激素诱导的人肝细胞中BSEP、NTCP表达的影响。
结果正常人肝细胞中BSEP及NTCP均有表达。雌激素可增强肝细胞中AP-1的表达。siRNA1049有最佳沉默AP-1基因的作用,与空白对照组比较沉默效果明显(P<0.05),转染24 h以后沉默效率70.0%。AP-1基因表达水平在转染后24 h抑制明显,与阴性对照及空白对照组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。沉默AP-1表达可增强雌激素诱导肝细胞中BSEP、NTCP表达。干扰组中BSEP、NTCP mRNA及蛋白表达均高于空白对照组及未干扰组(P<0.05),而空白对照组与未干扰组BSEP及NTCP表达比较差异均无统计学意义(P>0.05)。
结论特异性siRNA沉默AP-1可下调雌激素诱导下肝细胞BSEP及NTCP的表达。