【摘 要】
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目的:制备人巨细胞病毒(HCMV)UL135原核表达蛋白及其多克隆抗体.方法:生物信息学分析HCMVUL135蛋白的跨膜区结构,经原核密码子优化后对胞外序列进行全基因合成,将序列克隆至原核
【机 构】
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温州医科大学附属第二医院妇产科,温州医科大学分子病毒与免疫研究所,.温州医科大学附属第一医院胃肠外科
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目的:制备人巨细胞病毒(HCMV)UL135原核表达蛋白及其多克隆抗体.方法:生物信息学分析HCMVUL135蛋白的跨膜区结构,经原核密码子优化后对胞外序列进行全基因合成,将序列克隆至原核表达载体构建pET21a(+)/HCMVUL135重组质粒,IPTG诱导蛋白表达后,Ni-NTA亲和层析法纯化UL135重组蛋白,免疫新西兰兔制备多克隆抗体,ELISA、Westernblot法检测抗体灵敏度和特异性.结果:HCMV的UL135基因在原核表达系统中成功表达,经Ni-NTA亲和纯化后获得高纯度的目的蛋白;免
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