探讨酸性环境对慢性肾衰竭大鼠血管钙化的影响及可能机制。
方法将22只雄性SD大鼠随机分为4组：假手术组(甲基纤维素灌胃)、慢性肾衰竭组(5/6肾切除术构建慢性肾衰竭大鼠模型，甲基纤维素灌胃)、慢性肾衰竭血管钙化组(甲基纤维素加骨化三醇灌胃)、酸干预组[甲基纤维素及骨化三醇灌胃加氯化铵(0.28 mmol/L)饮水]。采用von Kossa染色及邻甲酚酞络合酮比色法检测胸主动脉钙化情况；免疫组织化学方法检测胸主动脉runt相关转录因子2(runt-related transcription factor 2，runx2)和L型钙通道(calcium channels，L-type, LTCC)β3亚基表达。体外原代培养大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞(VSMCs)，用β-甘油磷酸盐(β-glycerophosphate，β-GP)诱导钙化。将细胞随机分为4组：正常＋pH7.4组、高磷＋pH7.4组(10 mmol/L β-GP)、高磷＋pH7.1组(高磷培养基基础上添加盐酸调整pH值为7.1)和维拉帕米干预组[高磷培养基基础上添加维拉帕米(调整浓度为20 mmol/L)]。采用茜素红染色及邻甲酚酞络合酮比色法检测细胞钙化情况；酶联免疫吸附法检测细胞碱性磷酸酶(ALP)活性；钙离子探针Fluo-3/AM检测血管平滑肌细胞胞外钙离子内流的效应变化；RT-PCR和Western印迹法检测LTCCβ3亚基、runx2的表达。
结果体内实验中，成功制备了慢性肾衰竭大鼠的血管钙化模型，与慢性肾衰竭血管钙化组相比，给予酸干预后，大鼠血管钙盐沉积明显减轻(P<0.05)，LTCCβ3亚基和runx2表达降低(P<0.05)。体外实验证明，酸性环境减少了VSMCs钙盐沉积，降低了ALP活性(P<0.05)，抑制了LTCCβ3亚基表达(P<0.05)，阻滞细胞外钙离子内流(P<0.05)，降低runx2的表达(P<0.05)。维拉帕米干预组VSMCs钙盐沉积和runx2表达均降低(P<0.05)。
结论酸性环境可以抑制血管钙化，其可能机制之一是通过抑制VSMCs LTCCβ3亚基表达，阻滞钙离子内流，抑制骨源性转分化实现的。