【摘 要】
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目的探讨以重建细胞端粒酶活性,达到延长经ptsA58H质粒转化的人胚肌腱细胞系(THETC)寿命的可行性.方法构建含人端粒酶逆转录酶(hTERT)cDNA的质粒pGRN145,体外转染THETC;通过
【机 构】
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四川大学华西医院修复重建外科研究室,LaboratoryofMedicalMolecularBiology
【基金项目】
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国家重点基础研究发展计划(973计划),国家高技术研究发展计划(863计划),中华医学基金会基金
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目的探讨以重建细胞端粒酶活性,达到延长经ptsA58H质粒转化的人胚肌腱细胞系(THETC)寿命的可行性.方法构建含人端粒酶逆转录酶(hTERT)cDNA的质粒pGRN145,体外转染THETC;通过形态学观察、平板克隆形成率检测、软琼脂培养、不同培养条件下细胞生长曲线的测定,免疫组化法染色分析胶原分泌类型,hTERT mRNA表达及端粒重复序列扩增-PCR法检测细胞端粒酶活性等,对转染前后的细胞生物学特性进行比较.结果经pGRN145质粒体外转染的THETC(telT)有端粒酶活性表达,并继续保持旺盛的
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