【摘 要】
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目的 探究下调XRCC6对人结直肠癌细胞凋亡、侵袭的影响及其与ATM/CHK1/p53信号通路的相关性.方法 将人结直肠癌细胞SW620分为对照组、si?NC组和si?XRCC6组.MTT法检测各组细胞活力;流式细胞法检测各组细胞凋亡水平;细胞划痕实验检测各组细胞迁移能力;Transwell检测各组细胞侵袭能力;定量聚合酶链反应(qPCR)检测ATM、CHK2、p53的转录水平;免疫印迹(Western blot)检测ATM、CHK2、p53的蛋白表达和磷酸化(p?ATM、p?CHK2、p?p53)水平.
【机 构】
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北京核工业医院普外科,北京 102413;首都医科大学宣武医院普外科,北京 100053;北京核工业医院核素诊疗中心,北京 102413
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目的 探究下调XRCC6对人结直肠癌细胞凋亡、侵袭的影响及其与ATM/CHK1/p53信号通路的相关性.方法 将人结直肠癌细胞SW620分为对照组、si?NC组和si?XRCC6组.MTT法检测各组细胞活力;流式细胞法检测各组细胞凋亡水平;细胞划痕实验检测各组细胞迁移能力;Transwell检测各组细胞侵袭能力;定量聚合酶链反应(qPCR)检测ATM、CHK2、p53的转录水平;免疫印迹(Western blot)检测ATM、CHK2、p53的蛋白表达和磷酸化(p?ATM、p?CHK2、p?p53)水平.结果 MTT实验结果表明,与对照组和si?NC组相比,si?XRCC6组细胞活力显著降低(P<0.05);流式细胞实验结果表明,与对照组和si?NC组相比,si?XRCC6组细胞存活比例降低(P<0.01),早期凋亡比例增加(P<0.01),晚期凋亡细胞比例显著增加(P0.05);细胞划痕及Transwell实验结果表明,与对照组和si?NC组相比,si?XRCC6组细胞迁移能力降低(P<0.01),侵袭能力降低(P<0.01).qPCR及Western blot结果表明,与对照组和si?NC组相比,si?XRCC6组细胞ATM、CHK2、p53的转录和蛋白表达水平有上升的趋势,其磷酸化蛋白p?ATM、p?CHK2、p?p53表达水平也具有上升的趋势.结论 下调XRCC6可以抑制人结直肠癌细胞活性,诱导细胞早期凋亡,其机制可能与ATM、CHK2、p53信号通路的调控及其磷酸化水平的调控相关.
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