【摘 要】
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目的探讨洗脱条件及其因素对凝血酶原复合物（PCC）中凝血因子（F）Ⅱ、Ⅶ、Ⅸ、Ⅹ及蛋白（P）C、S、Z、抗凝血酶（AT）8种有效成分收率及比活的影响。方法选择洗脱条件中柠檬酸钠、NaCl、pH 3种可变因素,每因素取3水平,根据正交表配制不同洗脱体系;采用DEAE-Sephadex A-50凝胶,相同平衡、洗涤条件及上述不同洗脱体系,批式吸附法制备PCC浓缩物;检测浓缩物中8种成分的活性或含量,获
【机 构】
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中国医学科学院北京协和医学院输血研究所
【基金项目】
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2009年国家卫生行业科研专项（200902008-2）； 国家高技术研究发展计划（“863”计划）项目（2012AA021903-3）；
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目的探讨洗脱条件及其因素对凝血酶原复合物（PCC）中凝血因子（F）Ⅱ、Ⅶ、Ⅸ、Ⅹ及蛋白（P）C、S、Z、抗凝血酶（AT）8种有效成分收率及比活的影响。方法选择洗脱条件中柠檬酸钠、NaCl、pH 3种可变因素,每因素取3水平,根据正交表配制不同洗脱体系;采用DEAE-Sephadex A-50凝胶,相同平衡、洗涤条件及上述不同洗脱体系,批式吸附法制备PCC浓缩物;检测浓缩物中8种成分的活性或含量,获得各成分的收率及比活;正交试验分析不同洗脱条件及其因素对8种成分收率及比活的影响。结果不同洗脱条件8种成分收率及比活有一定差异,2.4 mol/L NaCl条件比活总体较高。在所考察范围内,柠檬酸钠对FⅡ、FⅨ、FⅩ、PC、AT收率和PC、PS、AT比活有较大影响;NaCl对FⅦ、FⅩ、PS、PZ收率和FⅡ、FⅦ、FⅨ、FⅩ、PZ比活有较大影响。不同水平条件,柠檬酸钠及NaCl含量越高,4种凝血因子收率与比活越高,但对4种抗凝蛋白收率及比活影响无规律;pH6.6水平,4种凝血因子收率较高,pH6.9,其比活较高,pH对4种抗凝蛋白收率与比活的影响无规律。结论洗脱条件中高浓度的NaCl可提高PCC的整体比活;低浓度的柠檬酸钠对PCC有效成分收率及比活也有较大影响;pH对PCC中凝血因子（FⅡ,Ⅶ,Ⅸ,Ⅹ）收率及比活的影响分别有共性,对抗凝蛋白（PC,PS,PZ,AT）的影响则无规律。
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