水稻小穗cDNA文库的构建

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用蛋白酶K-苯酚法,从开花后7~14天的水稻小穗,抽提纯化出有生物学活性的总poly(A)~+RNA,在AMV逆转录酶作用下,将它反转录合成第一链cDNA,并在DNA聚合酶I和核酸酶SI作用下,合成双链cDNA。cDNA经甲基化修饰,通过EcoRI接头与表达型载体λgtll DNA连接,经离体包装构建出水稻开花后小穗cDNA文库。该文库的复杂度为2.4 ×10~6pfu,重组体的比率为14%。
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