探讨pORF5质粒蛋白抗凋亡分子机制，为进一步阐明沙眼衣原体致病机制提供实验依据。
方法将HeLa细胞分为两组，一组用凋亡诱导剂碳酰氰基-对-氯苯腙（CCCP）刺激30 min，另一组经pORF5质粒蛋白预处理18 h后，再用CCCP刺激30 min。然后，Western印迹检测细胞凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax和胱天蛋白酶3（caspase-3）的表达水平；JC-1荧光探针检测HeLa细胞线粒体膜电位变化；间接免疫荧光观察细胞色素c释放情况。为了分析高迁移率族蛋白1（HMGB1）是否参与pORF5质粒蛋白的抗凋亡作用，分别用HMGB1 shRNA和对照RNA稳定转染HeLa细胞，再用pORF5质粒蛋白与CCCP共刺激两种细胞后，测定Bcl-2、Bax和活化的caspase-3蛋白的表达以及细胞色素c的释放情况。两组间比较采用配对样本t检验。
结果pORF5质粒蛋白能拮抗CCCP诱导的线粒体膜电位的下降，CCCP单独处理组Hela细胞红/绿荧光强度比率为0.4 ± 0.1，显著低于pORF5与CCCP共处理组（1.7 ± 0.3，t = 6.95，P < 0.01）。与对照组相比，pORF5与CCCP共处理组HeLa细胞Bcl-2蛋白表达水平增加（5.3 ± 0.6）倍（t = 8.62，P < 0.01），而Bax和活化的caspase-3平均表达水平分别降低79% ± 10%（t = 9.23，P < 0.01）和75% ± 8%（t = 4.26，P < 0.05）。与对照RNA转染组相比，HMGB1 shRNA转染组HeLa细胞线粒体膜电位下降（t = 11.23，P < 0.01），细胞色素c释放增加，Bcl-2的表达水平降低（t = 7.19，P < 0.05），而Bax的表达水平增加（t = 13.06，P < 0.01）。
结论沙眼衣原体pORF5质粒蛋白通过HMGB1阻断线粒体凋亡途径发挥抗凋亡作用。