【摘 要】
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目的 探讨长波紫外线（ultravioletA，UVA）致人皮肤成纤维细胞凋亡过程中胞内活性氧簇（reactiveoxygenspecies，ROS）及细胞自噬的调控作用。方法取生长良好的人皮肤成纤维细胞，按照不同处理方式分组并给予处理后，以UVA照射后观察成纤维细胞生长状态，MTT法检测成纤维细胞增殖活性，流式细胞技术检测成纤维细胞凋亡以及胞内ROS水平，Westernblot检测自噬相关蛋白P
【基金项目】
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四川省科学技术厅 应用基础研究计划（2018JY0406）；
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目的 探讨长波紫外线（ultravioletA，UVA）致人皮肤成纤维细胞凋亡过程中胞内活性氧簇（reactiveoxygenspecies，ROS）及细胞自噬的调控作用。方法取生长良好的人皮肤成纤维细胞，按照不同处理方式分组并给予处理后，以UVA照射后观察成纤维细胞生长状态，MTT法检测成纤维细胞增殖活性，流式细胞技术检测成纤维细胞凋亡以及胞内ROS水平，Westernblot检测自噬相关蛋白P62、微管相关蛋白1轻链3（microtubule-associatedprotein1lightchain3，LC3）的表达水平。结果 UVA照射后，成纤维细胞皱缩变圆、细胞排列间隙增大、折光性降低，细胞活性下降，成纤维细胞凋亡比例明显增加。与对照组相比，在自噬诱导剂雷帕霉素（rapamycin，RAPA）处理的RAPA组中，细胞轮廓清晰，细胞排列紧密，呈火焰状，细胞形态变化不明显，并且可显著抑制UVA照射引起的成纤维细胞凋亡；相反，在自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤（3-methyladenine，3-MA）处理的3-MA组中，细胞皱缩变圆，细胞间隙增宽，细胞折光性降低，漂浮细胞较对照组多，并且升高了UVA照射引起的成纤维细胞凋亡比例。与对照组相比，UVA照射后成纤维细胞内ROS水平显著增高（P＜0.01）、LC3II/I比值增大（P＜0.01），P62的表达显著减少（P＜0.01）。UVA照射经抗氧化剂N-乙酰-L-半胱氨酸（NAC）预处理后细胞的胞内LC3II/I比值下降（P＜0.05）、P62的表达显著增加（P＜0.05）。结论UVA照射促进细胞内ROS水平升高，从而诱导细胞自噬，抑制UVA致人皮肤成纤维细胞凋亡。
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