【摘 要】
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根据已发表的IBDV基因组序列设计并合成一对特异扩增IBDV VP2cDNA的引物,以纯化的IBDV—D78弱毒疫苗株基因组为模板,利用RT—PCR技术扩增出约1.5kb产物.将PCR产物克隆到pUC19
【机 构】
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中国农科院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室; 中国农科院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室 哈尔滨150001; 哈尔滨150001;
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根据已发表的IBDV基因组序列设计并合成一对特异扩增IBDV VP2cDNA的引物,以纯化的IBDV—D78弱毒疫苗株基因组为模板,利用RT—PCR技术扩增出约1.5kb产物.将PCR产物克隆到pUC19的Smal位点,经酶切图谱分析等方法鉴定出重组VP2cDNA质粒(pVP2).将VP2基因正向插入FPV启动子LP2EP2下游,连同痘菌病毒启动子P11启动的LacZ报告基因盒插入FPV转移载体中的FPV复制非必需片段,经鉴定,成功构建了重组FPV—VP2转移载体.
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