目的 探讨超顺磁性纳米磁粒子复合物Fe2O3-多聚赖氨酸(PLL)标记外周血内皮祖细胞(EPCs)后对细胞生物学特性的影响,为标记细胞的体内外MRI提供实验基础.方法 合成Fe2O3-PLL复合物.分离兔外周血单个核细胞,贴壁法筛选出EPCs,25 mg/L的Fe2O3-PLL标记EPCs,普鲁士蓝染色、电子显微镜观察细胞内铁,四氮噻唑蓝(MTT)比色试验比较未标记、标记细胞间生长曲线的差异,流式细胞分析检测标记、未标记细胞的细胞周期变化、细胞凋亡、表面标记物表达情况,实时定量聚合酶链反应(PCR)检测标记、未标记细胞的内皮型一氧化氮合酶(eNOS)、KDR、血管性假血友病因子(vWF)基因在mRNA水平上的差异,激光共聚焦显微镜下观察并分析标记、未标记细胞的Ca2+浓度、膜流动性变化.实验所得数据,计量资料多组比较采用方差分析,两组间比较采用两样本t检验.结果 Fe2O3-PLL对细胞的标记率接近100%,铁颗粒位于细胞质内.25 mg/LFe2O3-PLL标记细胞,其生长曲线、细胞周期[G0-G1期为(93.74±3.52)%]、细胞凋亡[早期凋亡率为(12.89±1.81)%]与未标记细胞[细胞周期为(94.57±3.66)%,细胞凋亡率(11.67±1.18)%]相比,差异无统计学意义(t值分别为0.283、0.977、P值均>0.05);eNOS、KDR、vWF基因的相对表达量及CD34、CD106、CD146、KDR等细胞表面标记物的表达水平相比差异也无统计学意义(P值均>0.05);对Ca2+通道影响小,细胞膜流动性无明显变化.结论 25 mg/L的Fe2O3-PLL对兔外周血EPCs的标记率接近100%,并且对细胞的生物学特性无明显影响,可用于进一步MRl的研究。
纳米磁粒子复合物标记对内皮祖细胞生物学特性影响的实验研究
【摘 要】
:
目的 探讨超顺磁性纳米磁粒子复合物Fe2O3-多聚赖氨酸(PLL)标记外周血内皮祖细胞(EPCs)后对细胞生物学特性的影响,为标记细胞的体内外MRI提供实验基础.方法 合成Fe2O3-PLL复合物.分离兔外周血单个核细胞,贴壁法筛选出EPCs,25 mg/L的Fe2O3-PLL标记EPCs,普鲁士蓝染色、电子显微镜观察细胞内铁,四氮噻唑蓝(MTT)比色试验比较未标记、标记细胞间生长曲线的差异,流式
【机 构】
:
210009南京,江苏省分子影像与功能影像重点实验窀东南大学附属中大医院放射科,现在南京大学医学院附属鼓楼医院放射科工作,210008,210009南京,江苏省分子影像与功能影像重点实验窀东南大学附属
【出 处】
:
中华放射学杂志
【发表日期】
:
2008年42期
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