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目的:体外研究肺癌细胞条件培养液(conditioned medium,CM)对前骨细胞亚克隆14细胞株MC3T3-E1Subclone14增殖、分化和矿化的作用。方法:收集人肺腺癌A549细胞CM,以10%A549CM和20%A549CM加入MC3T3-E1Subclone14细胞培养液,采用CCK-8(cell counting kit-8)法检测MC3T3-E1Subclone14细胞增殖,碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)试剂盒检测MC3T3-E1Subclone14细胞中ALP的活性,茜素红染色检测MC3T3-E1Subclone14细胞的矿化能力,实时荧光定量PCR检测MC3T3-E1Subclone14细胞中ALP、骨钙蛋白(osteocalcin,OCN)、Ⅰ型胶原蛋白α1(collagen typeⅠalpha1,Col1α1)及RUNX2(runt-related transcription factor2)mRNA的表达。结果:MC3T3-E1Subclone14细胞培养24和48h时,10%A549CM组和20%A549CM组的细胞增殖率均高于不加A549CM的对照组(P<0.05);10%A549CM组和20%A549CM组MC3T3-E1Subclone14细胞中ALP活性低于对照组(P<0.05);A549CM组矿化结节的数量和面积均小于对照组(P<0.05);A549CM组MC3T3-E1Subclone14细胞中ALP、OCN、Col1α1和RUNX2mRNAs的表达水平明显低于对照组(P<0.05)。结论:肺癌A549细胞CM可促进MC3T3-E1Subclone14细胞的增殖,抑制其分化和矿化。