【摘 要】
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目的:应用多重PCR与毛细管DNA电泳法检测骨髓增殖性肿瘤(MPN)主要致病基因中的JAK2V617F及CALR第九外显子突变,并对该方法的检测性能进行评价.方法:同时设计特异性的JAK2617F
【机 构】
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内蒙古医科大学附属医院检验科,内蒙古呼和浩特010050内蒙古医科大学附属医院病理科,内蒙古呼和浩特010050;内蒙古医科大学基础医学院,内蒙古呼和浩特010050;
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目的:应用多重PCR与毛细管DNA电泳法检测骨髓增殖性肿瘤(MPN)主要致病基因中的JAK2V617F及CALR第九外显子突变,并对该方法的检测性能进行评价.方法:同时设计特异性的JAK2617F等位基因突变PCR引物以及CALR基因第九外显子扩增引物,对引物进行Cy5荧光标记,所有引物在同一PCR反应管中进行扩增,并将PCR产物进行毛细管电泳分析,同时验证该方法的检测限、灵敏度,并与商品化试剂盒进行对比.结果:多重PCR与毛细管电泳技术结合可在一个PCR反应中同时检测JAK2 V617F与CALR基因突变,可以在0.01 ng的基因组DNA中检测出JAK2V/617F突变,可在0.1 ng的基因组DNA检测出JAK2 V617F与CALR双阳性突变,至少可检测出0.1％的JAK2V617F阳性突变,该方法与商品化诊断试剂盒进行对比结果相一致.结论:基于多重PCR与毛细管电泳技术,可在外周血中同时检测JAK2V617F与CLAR基因第九外显子突变,该方法为MPN的诊断提供了新的分子检测手段.
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