【摘 要】
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拟构建一种具有潜在肝肿瘤靶向作用的T7肽修饰氧化还原敏感聚酰胺-胺(T7-PEG-SS-PAMAM,T7-PSSP)复合物,并用于M2型丙酮酸激酶(PKM2)-siRNA的体外递送。聚合物T7-PSSP的结构特
【基金项目】
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国家自然科学基金(81302719);江苏省自然科学基金(BK20151224);苏州科技发展项目(SYS201713)
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拟构建一种具有潜在肝肿瘤靶向作用的T7肽修饰氧化还原敏感聚酰胺-胺(T7-PEG-SS-PAMAM,T7-PSSP)复合物,并用于M2型丙酮酸激酶(PKM2)-siRNA的体外递送。聚合物T7-PSSP的结构特征通过~1H NMR进行确证。制备的T7-PSSP/siRNA复合物粒径为(119.8±0.76)nm,多分散系数(PDI)为0.19±0.12,ζ电位为(8.92±0.38)mV。琼脂糖凝胶电泳试验证明载体-基因复合物具有较好的稳定性,且对siRNA具有较好的保护作用。通过凝胶电泳法观察到,在谷胱甘肽还原剂的作用下,siRNA能快速从PSSP/siRNA复合物中释放出来,说明PSSP/siRNA复合物在还原环境中可有效释出携载的siRNA。体外摄取试验表明,T7肽的修饰可以显著提高siRNA在肝癌细胞HepG2中的摄取量。实时荧光定量RT-PCR结果显示,与阴性对照和其他复合物组相比,T7-PSSP/siRNA具有最高的PKM2基因转染和沉默效率。
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