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为建立鸡黄病毒（CFV）分子生物学检测方法，本研究以虫媒介黄病毒基因3’末端通用引物EMF1／VD8作为鉴别引物，以CFV分离株CJD-05为模板，建立了检测CFV的RT-PCR方法。RT-PCR扩增产物测序结果显示，其扩增片段为708bp，而该方法对其它禽类病毒病原核酸的扩增结果均为阴性，表明该方法具有较高的特异性。扩增的特异性片段与GenBank中CFV、鸭黄病毒和鹅黄病毒序列同源性达到100％、98％和99％。对参考病毒进行梯度稀释检测，该方法检测CFV的敏感度可达10^-3TCID50/0．1mL