【摘 要】
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目的:应用抑制性消减杂交技术,分离热应激过程中出现的差异表达基因,筛选与热应激相关的功能基因片断,探索热应激的分子机理.方法:实验分两组:热应激组和常温对照组,分别提取
【机 构】
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第一军医大学热带军队卫生学系,第一军医大学热带军队卫生学系,第一军医大学南方医院呼吸内科
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目的:应用抑制性消减杂交技术,分离热应激过程中出现的差异表达基因,筛选与热应激相关的功能基因片断,探索热应激的分子机理.方法:实验分两组:热应激组和常温对照组,分别提取肝组织mRNA后反转录cDNA.内切酶酶切、接头连接后,以热应激组cDNA为tester,对照组cDNA为driver进行SSH.产物克隆T/A载体构建重组质粒转化感受态细胞后进行分离筛选.结果:mRNA质优量足,反转录cDNA并成功酶切为500 bp左右片断.连接效率满意.高效杂交后成功构建消减文库,并初步从中分离获得180个片段.结论:
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