【摘 要】
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通过长距离PCR从山羊基因组DNA分两段扩增山羊β乳球蛋白(β-lactoglobulin,BLG)基因,扩增出的两个片段分别克隆到T载体上,利用BLG基因序列自身存在的NarI单酶切位点进行拼接
【基金项目】
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国家高技术研究发展计划(863计划),上海市现代生物与新药产业发展基金
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通过长距离PCR从山羊基因组DNA分两段扩增山羊β乳球蛋白(β-lactoglobulin,BLG)基因,扩增出的两个片段分别克隆到T载体上,利用BLG基因序列自身存在的NarI单酶切位点进行拼接,获得了全长为7.2kb的山羊BLG基因克隆,并构建了它的真核表达载体,经酶切鉴定和序列分析证实了克隆的正确性.用线性化的BLG基因显微注射小鼠受精卵以建立转基因鼠,经PCR和Southern印迹分析证实获得了6只首建者(Founder)转基因小鼠(3♀,3♂),在泌乳期采集两只F0代转基因雌鼠乳汁并用ELISA
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