随机扩增多态DNA规范化反应体系的探讨

来源 :黄冈职业技术学院学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:nokisoki
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在研究猪分子标记遗传距离同杂种优势的关系时,对模板浓度和纯度、引物浓度、dNTP浓度、Mg2+浓度、不同商标的Tag酶等影响RAPD扩增的因素进行了系统的分析,在此基础上建立了适宜于本实验室研究的最佳RAPD技术体系:25(l反应体系中,含10×buffer2.5(l,MgCl21.75mmol/L,dNTPO.25mmol/L,引物0.24(mol/L,Tag酶2U,模板50~100ng,1(g/(lBSA.反应程序为:94℃预变性5min,然后94℃变性1min,36℃退火1min,72℃延伸2min40个循环,最后在72℃延伸10min.
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