【摘 要】
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目的:探索转化生长因子-β1(TGF-β1)对大鼠肝星状细胞端粒酶表达的影响以及肝纤维化过程中TGF-β1所起的作用。方法:梯度密度离心法分离正常大鼠肝脏中原代肝星状细胞并分两
【机 构】
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中南大学湘雅三医院药剂科; 中南大学湘雅三医院心内科; 中南大学湘雅三医院医学实验中心;
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目的:探索转化生长因子-β1(TGF-β1)对大鼠肝星状细胞端粒酶表达的影响以及肝纤维化过程中TGF-β1所起的作用。方法:梯度密度离心法分离正常大鼠肝脏中原代肝星状细胞并分两组培养。肝星状细胞的形态通过荧光倒置显微镜观察,肝星状细胞的纯度通过免疫细胞化学染色和自发荧光鉴定。分别观察用浓度为0,0.1,1,10 ng/mL的TGF-β1处理24 h和1 ng/mL TGF-β1处理并培养3,6,9 d,观察肝星状细胞的端粒酶反转录酶(telomerase reverse transcriptase,TERT)mRNA的表达变化。结果:细胞形态学观察结果表明TGF-β1能触发HSCs从静息状态向高度分化的肌成纤维细胞的转化。正常大鼠原代肝星状细胞中TERT mRNA的表达随细胞培养时间的增加而增加,但相邻时间点间差异无统计学意义(P>0.05)。与0 ng/mL组相比,0.1 ng/mL TGF-β1处理HSCs 1 d对TERT mRNA的表达无明显抑制作用,而浓度为1 ng/mL和10 ng/mL TGF-β1处理HSCs 1 d能显著抑制TERT mRNA的表达(P<0.05)。用1 ng/mL TGF-β1处理HSCs 3 d对TERT mRNA的表达无明细抑制作用,1 ng/mL TGF-β1处理HSCs 6 d能显著抑制TERT mRNA的表达(P<0.05)。TGF-β1对HSCs中TERT mRNA的抑制作用呈浓度和时间依赖性。结论:肝纤维化过程中,TGF-β1可能通过减少端粒酶反转录酶的表达来促进肝星状细胞的转化,从而促进肝纤维化的进展。
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