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用差速离心结合琼脂糖凝胶层析纯化的鸡传染性支气管炎病毒（ＩＢＶ）制备抗原免疫兔，是高效价的多克隆免疫血清，提纯ＩｇＧ后用辣根过氧化物酶标记，建立了检测ＩＢＶ的斑点酶联免疫吸附试验（Ｄｏｔ－ＤＥＬＩＳＡ）方法，对影响本方法因素的研究表明，当酶标抗体作１：１００稀释、工作时间为３７℃，６０ｍｉｎ时结果最理想，对待检组织用氯仿处理，对硝酸纤维素膜用０．３％Ｈ２Ｏ２处理３０ｍｉｎ可有效地消除组织内过氧化物