探讨细胞内印度刺猬蛋白(Ihh)表达水平变化对软骨终板细胞的影响与意义。
方法2018年5月至12月手术收集山西医科大学附属山西省人民医院骨科31例软骨终板(CEP)组织标本，体外分离人CEP细胞培养至P3代，随机分为过表达组、空载体组和敲减组，分别添加Ihh信使RNA质粒、空载体和Ihh沉默RNA质粒，质粒转染培养48 h后，使用蛋白质印迹法(Western blot)和实时定量聚合酶链反应法(RT-qPCR)检测标本Ihh及相关指标的蛋白和mRNA表达，免疫荧光和原位杂交染色观测细胞表型。3组实验数据因方差不齐，呈正态性分布，选择Welch检验，Games-Howell法组间多重比较。
结果质粒干预CEP软骨细胞Ihh水平表达，Westernblot结果显示过表达组、空载体组和敲减组3组细胞中Ihh(0.79±0.09，0.31±0.20，0.04±0.03)、Ⅱ型胶原(Col Ⅱ) (0.18±0.08，0.49±0.14，1.13±0.27)和基质金属蛋白酶-13(MMP-13)(0.78±0.17，0.51±0.12，0.37±0.06)灰度值差异有统计学意义(F＝176.670、37.650、26.070，P<0.01)。RT-qPCR结果显示过表达组、空载体组和敲减组3组细胞中Ihh mRNA(3.13±1.21，0.92±0.18，0.39±0.22)、Col Ⅱ mRNA(0.66±0.13，1.03±0.24，1.64±1.32)和MMP-13 mRNA(9.17±2.35，1.04±0.27，3.56±0.26)相对表达水平差异有统计学意义(F＝17.170、15.890、34.732，P<0.01)。免疫荧光和原位杂交结果显示与空载体组比较，Ihh和MMP-13在过表达组最强，敲减组最弱，而Col Ⅱ在敲减组中最强，过表达组最弱。
结论下调软骨细胞内Ihh表达可明显增加Col Ⅱ，减少MMP-13，维持细胞表型，进一步延缓CEP软骨细胞退变。