幽门螺杆菌hpaA基因工程菌蛋白表达条件优化、纯化及其活性鉴定

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目的:优化幽门螺杆菌hpaA基因工程菌(pMAL-c2X-hpaA-TBl)的表达条件,并对其表达产物进行纯化和免疫活性鉴定。方法:通过诱导表达实验了解不同诱导时机、诱导剂浓度、诱导时间对蛋白表达量的影响,并应用SDS-PAGE方法对表达产物进行分析;Amyloss树脂预装柱对可溶性HpaA蛋白进行分离、纯化;对纯化后蛋白做Westernblot实验鉴定免疫活性。结果:该工程菌培养2h时加入异丙基-β-D硫代半乳糖苷(IPTG)终浓度为0.3mmol/L进行诱导4h,目的蛋白表达量达到菌体总蛋白的30%以
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