【摘 要】
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本文旨在建立一种快速、高效的鉴别金钱白花蛇药材及其伪品的PCR方法。通过对金钱白花蛇及其伪品的Cytb序列进行序列比对分析,设计1对能准确鉴别正品金钱白花蛇和其伪品的引
【机 构】
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首都医科大学中医药学院,中国中医科学院中药研究所,北京市药品检验所,
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本文旨在建立一种快速、高效的鉴别金钱白花蛇药材及其伪品的PCR方法。通过对金钱白花蛇及其伪品的Cytb序列进行序列比对分析,设计1对能准确鉴别正品金钱白花蛇和其伪品的引物。采用商品化基因组DNA提取试剂盒提取基因组总DNA,采用两步循环PCR程序进行PCR鉴别,并对影响PCR结果的主要因素(退火温度、Taq酶用量、循环次数等)进行方法学考察和优化,对不同公司PCR仪、Taq酶产品进行普适性试验。在方法学考察的基础上,以试剂盒提取药材正品13批、伪品20批,反应参数:95℃预变性5min,循环反应30次(95℃30s,55℃45s),72℃延伸5min的条件可使所有受检样品得到准确鉴定,鉴别过程可在4h内完成,适合于金钱白花蛇PCR鉴别方法的推广应用。
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