烟草Nt14-3-3-like C基因的克隆与功能分析

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烟草花叶病毒(tobacco mosaic virus,TMV)寄主范围广泛、传染性极强,严重影响作物的产量和品质.实验室前期在不同耐受TMV侵染的烟草品种中筛选出1个表达显著差异的蛋白14-3-3-likeC,在此基础上,对Nt14-3-3-like C基因进行了克隆、生物信息学分析和亚细胞定位;通过农杆菌介导遗传转化,获取转基因植株;通过qPCR对转基因植株中TMV侵染响应相关基因的表达进行分析.结果 显示,14-3-3-1ike C蛋白序列长度为780bp,编码260个氨基酸,具有14-3-3蛋白的典型沟槽结构,但没有跨膜结构和信号肽;定位于细胞核和细胞膜;转基因材料的qPCR分析发现,在Nt14-3-3-like C基因抑制的植株中,病原防卫和光合途径相关的基因表达显著下降,表明Nt14-3-3-likeC可能通过抑制病原防卫和光合途径相关基因表达参与TMV对烟草的侵染.
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