绿色木霉纤维二糖水解酶基因的克隆及其在乳酸菌中的表达与鉴定

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采用乳酸菌表达系统进行绿色木霉纤维二糖水解酶基因cbhⅡ 的表达研究.参照GenBank上发表的绿色木霉(Trichoderma viride)cbhⅡ 基因(GenBank登录号:M55080)设计引物并通过聚合酶链式反应克隆获得其cDNA序列长1 441 bp.为了达到表达分泌该酶的目的,在其基因上游序列前添加了大小为80 bp的信号肽序列.进一步通过生物信息学方法将密码子按照乳酸菌的偏好性进行了优化,通过全基因合成获得了优化后的cbhⅡ 基因.将该基因与穿梭表达载体pMG36e连接, 构建原核表达载
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