基于斑马鱼模型的补骨脂毒性相关成分群的高效辨识研究

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目的 基于斑马鱼模型结合相关分析高效辨识补骨脂毒性成分群.方法 采用高效液相色谱法测定7个产地18个批次补骨脂中4个香豆素类、4个黄酮类和补骨脂酚的含量.以斑马鱼(6dpf)死亡率、脏器中毒形态、半数致死浓度(lethal concentration 50,LCso)值为指标,采用斑马鱼模型评价18个批次补骨脂水煎液的毒性.将各类成分的含量分别与斑马鱼LC50值进行相关分析,辨识毒性成分群,并通过对代表成分的斑马鱼毒性评价进行验证.结果 不同产地18个批次补骨脂水煎液中香豆素类、黄酮类、补骨脂酚的含量差异较大,4个香豆素类成分、黄酮成分(新补骨脂异黄酮)和补骨脂酚含量最大值分别是最小值的3.47?5.60、5.30、6.47倍.斑马鱼毒性评价结果显示18个批次补骨脂水煎液对斑马鱼毒性差异较大,其中LC50最大值是最小值的7.2倍.毒性与成分含量相关分析结果表明,斑马鱼毒性与黄酮类成分、补骨脂酚的相关性较好(R2分别为0.623 4、0.587 8),与香豆素类成分的相关性较低(R2为0.187 7).各类代表成分的毒性评价结果表明,补骨脂酚和3个黄酮成分(补骨脂甲素、新补骨脂异黄酮、补骨脂乙素)是补骨脂致毒的关键成分,香豆素类成分的安全性相对较好.结论 斑马鱼模型可高效、灵敏反映不同批次补骨脂毒性的差异,通过毒性与成分含量的相关分析,能够快速发现补骨脂中毒性相关成分群,为从中药复杂体系快速发现毒性及其相关物质提供依据.
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