【摘 要】
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目的建立一种灵敏、快速、方便的检测登革热抗原新方法,为登革热的临床诊断提供帮助。方法建立了一种基于微流控免疫磁珠快速检测登革热抗原检测方法。使用Solidwork软件设计
【机 构】
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中山大学孙逸仙纪念医院; 珠海市中西医结合医院; 广东医科大学; 广州市宝创生物技术有限公司;
【基金项目】
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广东省自然科学基金(2014A030313070)
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目的建立一种灵敏、快速、方便的检测登革热抗原新方法,为登革热的临床诊断提供帮助。方法建立了一种基于微流控免疫磁珠快速检测登革热抗原检测方法。使用Solidwork软件设计微流控芯片,采用机械加工法和化学封接方式制备微流控芯片;利用化学偶联反应制备登革热抗体免疫磁珠;在微流控芯片载体上,以HRPTMB-H2O2为显色体系,利用双抗体夹心法原理检测登革热NS1抗原;最后,同时应用该方法与传统ELISA试剂盒对57例临床样品进行检测,分析该方法的正确度,并对两种方法的优缺点进行比较。结果微流控免疫磁珠方法整个检测过程仅需20 min,反应体系只需磁珠量10μg和样品量10μL;验证实验中,该方法可以将阴性和阳性明显区分开,阳性样本有显色,阴性、空白样本均无显色;性能上,该新型ELISA方法与传统ELISA方法结果阴阳性符合率达到100%。结论该新型ELISA检测方法具有简便、快速、节省试剂和所需样本少、灵敏度高、稳定性好、准确性高等优点,可以用于登革热抗原检测。
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