【摘 要】
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目的 探索脂肪干细胞(adipose-derived stem cell,ASC)与脱细胞真皮基质微粒(micronized acellular dermal matrix,MADM)复合培养后用于声带内注射的可行性.方法 体外分离培
【机 构】
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第四军医大学西京医院全军耳鼻咽喉头颈外科中心,第四军医大学西京医院中医药研究所,第四军医大学口腔医学院口腔病理学教研室
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目的 探索脂肪干细胞(adipose-derived stem cell,ASC)与脱细胞真皮基质微粒(micronized acellular dermal matrix,MADM)复合培养后用于声带内注射的可行性.方法 体外分离培养兔ASC,取第3代细胞,用细胞膜红色荧光探针(DiI)标记,并与已制备好的MADM复合培养,形成细胞和材料复合体,应用荧光显微镜、扫描电镜了解ASC黏附材料情况,四唑类化合物3-(4,5-dimethylthizazol-2-yl)-5-(3-carboxymethoxyphenyl)-2-(4-sulfonyl)-2H-tetrazolium,inner salt(MTS)比色法检测细胞增殖情况.ASC-MADM复合体培养3 d后与适量胶原混合后注入异体兔单侧声带内,术后2、4、8周内镜观察,并分别处死动物,检测ASC在声带中存活、分布情况.结果 MADM所含胶原纤维松散、多孔隙,具有良好三维结构;ASC可黏附其生长并能不断增殖,与没有复合MADM的对照组比较细胞增殖水平差异有统计学意义(P值均＜0.05或＜0.01).ASC-MADM复合体注入兔声带肌后均存活良好,连续内镜观察、冰冻切片、HE染色显示声带局部无不良反应,ASC-MADM复合体在兔声带内基本无炎症细胞浸润,ASC可在声带内存活8周.结论 MADM是较理想的细胞支架材料,ASC能黏附MADM生长并增殖.ASC-MADM复合体异体动物声带内注射可存活且无不良反应.
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