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目的
比较木质素过氧化物酶(LiP)、锰过氧化物酶(MnP)和漆酶对优黑素和褐黑素的脱色活性并观察外用LiP对308 nm准分子光诱导豚鼠皮肤色沉斑的影响。
方法碱溶法从人毛发及皮肤黑素瘤组织中提取褐黑素并商业购买优黑素,将等量(0.02%)黑素与相同活性单位(200 U/L)的3种木质素降解酶孵育3 h,使用酶标仪测定反应液A475值变化;用308 nm准分子光诱导豚鼠皮肤色沉斑模型,将LiP与加热灭活LiP反应液外涂于色沉斑处,同时用3%氢醌乳膏与乳膏基质作对照。用皮肤色度计测定L值变化;胶带法采集脱落角质层细胞,Fontana-Masson嗜银染色观察脱落角质层细胞与皮肤组织中黑素颗粒的分布与数量。
结果3种木质素降解酶对优黑素及褐黑素均有脱色活性,其中LiP脱色效率为40%~70%,MnP约为22%~42%,漆酶约为9%~21%;体内实验显示,LiP反应液与3%氢醌乳膏均可使色沉斑颜色变浅。脱落角质层细胞中黑素颗粒的平均数量,LiP组为199±11,低于空白组(923±12)和酶热灭活假处理组(989±13)。组织学检查发现氢醌组表皮增厚,全层黑素颗粒减少,而LiP组表皮正常,仅表皮浅层黑素颗粒减少,深层仍有黑素颗粒存在。
结论LiP对皮肤及毛发黑素脱色作用最强,优于MnP和漆酶,能否替代氢醌制剂成为新一代高效安全的皮肤增白剂用于临床有待进一步证实。