【摘 要】
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目的:探究吡咯烷二硫代氨基甲酸酯(PDTC)对脓毒症合并急性肾损伤(AKI)大鼠线粒体功能与Klotho表达的影响.方法:将60只SD大鼠随机分为对照组、模型组、PDTC组,每组20只,模型组和PDTC组大鼠通过盲肠结扎穿刺(CLP)制备脓毒症AKI模型,造模后1h,PDTC组大鼠腹腔注射50 mg/kg PDTC,模型组与对照组注射同等剂量生理盐水,每日1次,持续1周.ELISA法检测大鼠血清肌酐(SCr)、尿素氮(BUN)和24 h尿蛋白(24 h UP)水平,硫代巴比妥酸法检测肾组织丙二醛(MDA)
【机 构】
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湖北文理学院附属医院襄阳市中心医院儿科,襄阳441021
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目的:探究吡咯烷二硫代氨基甲酸酯(PDTC)对脓毒症合并急性肾损伤(AKI)大鼠线粒体功能与Klotho表达的影响.方法:将60只SD大鼠随机分为对照组、模型组、PDTC组,每组20只,模型组和PDTC组大鼠通过盲肠结扎穿刺(CLP)制备脓毒症AKI模型,造模后1h,PDTC组大鼠腹腔注射50 mg/kg PDTC,模型组与对照组注射同等剂量生理盐水,每日1次,持续1周.ELISA法检测大鼠血清肌酐(SCr)、尿素氮(BUN)和24 h尿蛋白(24 h UP)水平,硫代巴比妥酸法检测肾组织丙二醛(MDA)水平,微板法检测肾组织超氧化物歧化酶(SOD)水平,光谱光度测量工具检测肾组织总抗氧化能力(T-AOC)水平,苏木精—伊红(HE)染色和Masson染色观察肾组织病理形态学改变与胶原沉积现象,TUNEL染色检测肾组织细胞凋亡,免疫组织化学染色和实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测肾组织Klotho蛋白和mRAN表达水平,免疫荧光染色检测肾组织细胞色素C氧化酶Ⅳ(COXⅣ)和自噬标记轻链3(LC3)的共定位与表达以来评估线粒体水平,western blotting法检测肾皮质匀浆细胞色素-C(Cyto-C)、抗增殖蛋白(Prohibitin)蛋白表达.结果:相较于模型组,PDTC组血清SCr、BUN含量及24 UP水平均显著下降(均P＜0.05),肾组织SOD、T-AOC含量显著增加,MDA含量显著减少(P＜0.05),肾组织病理改变得到明显改善,胶原沉积减少,TUNEL阳性细胞率显著降低(P＜0.05),Klotho蛋白与mRNA表达水平均显著上调(P＜0.05),同时,LC3水平下降,肾皮质线粒体Cyto-C、Prohibitin蛋白表达显著升高(P＜0.05),肾皮质胞浆Cyto-C、Prohibitin蛋白表达显著降低(P＜0.05).结论:PDTC可通过调节线粒体功能和Klotho表达来改善大鼠脓毒症合并AKI,并有效减轻肾组织的氧化损伤.
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