探讨双氢睾酮(DHT)浓度波动对前列腺上皮细胞(RWPE-2细胞系)中错配修复基因MutL同源物(MLH1)表达的影响及其机制。
方法将RWPE-2细胞分为空白组，恒定组(DHT浓度为1、10 nmol/L)以及波动组(DHT浓度为1、10 nmol/L，每24 h波动1次)，以不同浓度的DHT干预不同的时间(0、24、48、72 h)，观察细胞的形态、生长状态及细胞计数试剂盒(CCK-8)检测细胞增殖能力；应用蛋白质印迹法(Western blot)、实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)技术检测雄激素受体(AR)信号通路靶基因[前列腺特异抗原(PSA)、FK506结合蛋白(FKBP5)]、苏氨酸蛋白激酶(Akt)信号通路靶基因[细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、B淋巴细胞瘤-2(bcl-2)]和MLH1基因表达的改变；免疫荧光法检测基因分布位置的变化。应用Graph Pad 7.0统计软件分析，组间差异采用t检验分析。
结果恒定组与波动组中RWPE-2细胞形态学变化与DHT作用具有浓度(1～10 nmol/L)依赖性；CCK-8结果提示，72 h后，与空白组(6.904±0.143)比较，恒定组(7.073±0.103)、(8.508±0.187)与波动组(8.662±0.327)、(9.239±0.167)相对吸光度(A)值均增加，提示DHT干预增强细胞增殖，呈时间浓度依赖性(1～10 nmol/L)，差异有统计学意义(t＝6.805、4.922、10.6，P<0.01)；Western blot结果提示，与空白组比较，波动组与恒定组中各靶基因的mRNA及蛋白表达水平均上调，波动组较恒定组中上述基因表达进一步上调，波动组FKBP5基因较恒定组表达下调，差异有统计学意义(t＝5.488、15.730、7.976、3.695、3.952、2.830，P<0.05)；免疫荧光结果显示，与空白组比较，波动组和恒定组中各靶基因核内分布增多，且波动组上述基因分布差异更显著。
结论DHT能上调RWPE-2细胞中错配修复基因MLH1的表达，而DHT波动会使这种趋势增加，通过AR和Akt信号通路介导的细胞增殖是其可能机制之一。