Cas9融合RAD18因子提高HEK293T细胞的定点敲入效率

来源 :华南农业大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：ssss426

【摘要】

：

【目的】在哺乳动物细胞中,RAD51和RAD18是调节同源定向修复和非同源末端连接的关键因子。本研究目的在于探讨这2个因子在eSpCas9系统中对HEK293T细胞的定点敲入(Knock-in,KI)效率的影响,进而提高KI效率。【方法】通过构建eSpCas9-RAD51、eSpCas9-RAD18融合蛋白以及过表达RAD51、RAD18载体,比较它们的KI效率差异。【结果】eSpCas9-RAD18系统可以显著提高HEK293T细胞KI效率,约为原来eSpCas9系统的1.4~1.9倍(P<0.0

【作者】

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黄广燕王豪强李国玲吴珍芳张献伟

【机构】

：

华南农业大学动物科学学院/国家生猪种业工程技术研究中心,温氏食品集团股份有限公司

【出处】

：

华南农业大学学报

【发表日期】

：

2021年5期

【关键词】

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基因编辑 CRISPR/Cas9系统基因敲入 RAD18 融合蛋白

【基金项目】

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国家转基因重大专项(2016ZX08006002),广东特支本土创新创业团队(2019BT02N630)。

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