【摘 要】
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目的:对Fas蛋白N端的30~108位肽段进行原核表达,制备可溶性蛋白,并完成二级结构分析。方法:利用BLAST程序进行同源性分析,确定所要构建的FasN端半胱氨酸富集结构域(CRD),PCR扩增目
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目的:对Fas蛋白N端的30~108位肽段进行原核表达,制备可溶性蛋白,并完成二级结构分析。方法:利用BLAST程序进行同源性分析,确定所要构建的FasN端半胱氨酸富集结构域(CRD),PCR扩增目的基因片段,将其克隆入表达载体pGEX-6P-1,并转化大肠杆菌BL21(DE3),于16℃用0.2mmol/L的IPTG诱导25h表达GST-Fas融合蛋白;用Glu-tathione Sepharose 4B柱分离GST-Fas融合蛋白,用PreScission蛋白酶切去GST标签,将洗脱的蛋白样品经Sup
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