【摘 要】
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目的 制备加载白血病抗原肽PR1的HLA-A*0201四聚体。方法构建HLA-A*0201-BSP和β2-微球蛋白(β2M)原核表达载体,进行目的蛋白表达、纯化。在体外将PR1(VLQELNVIV)与纯化的HLA-A*0201-BSP、β2M通过稀释复性折叠成HLA-A*0201-PR1复合物。利用BirA酶进行生物素标记。再经阴离子交换纯化得到生物素化的HLA-A*0201-PR1复合物单体。此
【机 构】
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军事医学科学院附属医院血液科,北京100071;北京第二炮兵总医院血液科,北京100088,军事医学科学院附属医院血液科,北京100071;北京第二炮兵总医院血液科,北京100088,军事医学科学院基
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目的 制备加载白血病抗原肽PR1的HLA-A*0201四聚体。方法构建HLA-A*0201-BSP和β2-微球蛋白(β2M)原核表达载体,进行目的蛋白表达、纯化。在体外将PR1(VLQELNVIV)与纯化的HLA-A*0201-BSP、β2M通过稀释复性折叠成HLA-A*0201-PR1复合物。利用BirA酶进行生物素标记。再经阴离子交换纯化得到生物素化的HLA-A*0201-PR1复合物单体。此单体与PE标记的链霉亲和素按4:1比例混合,即可形成四聚体。结果成功制备了HLA-A*0201-PRl四聚体。结论制备的HLA-A*0201-PR1四聚体为定量检测白血病患者体内PR1抗原特异性的细胞毒性T淋巴细胞提供了有力工具。
其他文献
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对COBAS AMPLICOR系统、多重PCR和巢式PCR扩增沙眼衣原体(CT)质粒和/或外膜蛋白(omp1)VD2基因,并以反向线点杂交技术(Reverse line blot hybridization assay,RLB)进行CT血清学分型对CT检测方法进行了比较。
众多资料显示急性呼吸道感染中90%~95%是由病毒感染所致,其中多种病毒具有感染力强、传播快、潜伏期短、发病急等特点,并且近来新的致病性病毒还在不断地被发现,如人类偏肺病毒、SARS病毒、高致病性禽流感病毒等,给临床疾病诊断和治疗造成极大的困难。
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目的 探讨分子佐剂hC3d3与hCGβ的融合蛋白hCGβ-hC3d3对人外周血单个核细胞(PBMC)中的B细胞与T细胞表面协同刺激分子表达及对hCGβ抗原反应性的影响。方法从人肝细胞cDNA文库克隆hC3d基因片段;构建pCI-gs-signal-6His-hCGβ及pCI-gs-signal-6His-hCGβ-hC3d3真核表达质粒,表达和纯化重组蛋白抗原hCGβ及hCGβ-hC3d3融合蛋白
目的 研究人食管癌是否存在螺杆菌感染及其与NF-κB p65蛋白的关系,从而探讨在人食管癌发生中的意义.方法 随机收集食管癌标本40例和正常食管标本10例,采用聚合酶链反应(PCR)扩增螺杆菌16S rRNA,随机选4例测序及同源比较.阳性者再扩增幽门螺杆菌(H.pylori,Hp)的特异基因相对分子质量(Mr)26×103的种特异性抗原和相关功能基因(CagA,VacA).并采用免疫组化法检测食
人禽流感病是由甲型禽流感病毒(AIV)某些亚型的毒株感染人引起的急性呼吸道传染病.人高致病性禽流感病的潜伏期一般为1~3 d,起病急,早期表现类似普通流感.主要症状为发热,伴有流涕、鼻塞、咳嗽、咽痛、头痛和全身不适.2006年2月22号,广州市一家医院发现1名患者出现"流感样"症状,表现为发热、咳嗽和白细胞数降低等发热肺炎症状,3月3日因治疗无效死亡。
军团病(Legionnaires'disease)是由军团菌感染引起的以肺炎为主要症状的急性呼吸道传染病,嗜肺军团菌(Legionella pneumophila,Lp)是引起军团病的主要菌群.目前研究发现军团菌广泛存在于自然界的土壤和各种水环境中,中央空调冷却塔是军团菌主要的传染源,近30年来军团病大的暴发多与中央空调冷却塔被军团菌污染有关。
1999年,Yá(n)ez等[1]首次从抗磷脂综合征患者的血液、口腔黏膜和支气管标本中分离到穿透支原体(Mpe,HF1~3),我们曾从肿瘤患者的血液与肿瘤组织中分离到Mpe[2],提示Mpe可从非HIV感染人群分离.近年来的研究表明,诸如肺炎支原体(Mp)、解脲脲原体(Uu)、人型支原体(Mh)、Mpe、发酵支原体(Mf)等人类致病性支原体的感染与多种自身免疫病相关[3].IgA肾病是一组多病因引
目的 白细胞介素5(IL-5)作为参与嗜酸粒细胞成熟、分化过程的最主要因子,其作用通过特异性受体IL-5Rα介导.本文以支气管上皮细胞株为研究对象,证实该上皮细胞株在炎症因子的刺激下可以表达IL-5Rα.方法 通过促炎症因子TNF-α和TH2型细胞因子IL-4、IL-5、IL-13以及白三烯成分之一的LTCA(白三烯C4)对细胞进行单独或协同刺激,以RT-PCR方法、流式细胞检测技术评价上皮细胞对