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目的 探索一种简单有效的大鼠睾丸间质细胞的分离、纯化方法。方法 采用0.1%Ⅱ、Ⅳ型胶原酶混合液消化组织块分离睾丸间质细胞，用差速贴壁法纯化间质细胞，用3β-HSD免疫荧光染色鉴定间质细胞，同时用酶联法测定间质细胞分泌睾酮的活性。结果 （1）采用0.1%Ⅱ、Ⅳ型胶原酶联合消化法分离睾丸间质细胞的最佳酶解时间为1h左右。（2）利用差速贴壁纯化睾丸间质细胞的最佳贴壁时间为1~2h。（3）培养24h后，3β-HSD免疫荧光染色鉴定睾丸间质细胞纯度达（98.1±1.5）%，盼蓝染色鉴定睾丸间质细胞存活率