【摘 要】
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目的研制灵敏度高、特异性好的抗泰妙菌素（TML）单克隆抗体。方法用肟化法和碳二亚胺法将TML分别与牛血清白蛋白（BSA）和卵清蛋白（OVA）偶联,制备免疫原TML-BSA和包被原TML-OVA,用TML-
【基金项目】
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国家科技支撑计划(2014BAD13B05);智汇郑州1125计划(2015年)
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目的研制灵敏度高、特异性好的抗泰妙菌素（TML）单克隆抗体。方法用肟化法和碳二亚胺法将TML分别与牛血清白蛋白（BSA）和卵清蛋白（OVA）偶联,制备免疫原TML-BSA和包被原TML-OVA,用TML-BSA免疫BALB/c小鼠,经细胞融合并采用间接ELISA筛选抗TML杂交瘤细胞株,用体内诱生法制备腹水和辛酸-硫酸铵法纯化获得单克隆抗体,并用SDS-PAGE鉴定。结果成功筛选出2株杂交瘤细胞株3B3和4A7,其细胞上清效价分别为1∶1600和1∶6400。纯化后单克隆抗体4A7的效价为5.12×105,半数抑制剂量(IC50)为0.049 ng/mL,亲和力常数Kaff为1.47×109 L/mol,与类似物瑞他帕林有2.7%的交叉反应率,与沃尼妙林、氟罗沙星等其他抗生素均无交叉反应。结论成功研制了抗TML单克隆抗体。
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