【摘 要】
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本研究旨在建立一种共刺激分子CD80、CD86 SYBR GreenⅠ荧光定量PCR检测方法。根据GenBank中牛CD80、CD86的基因序列设计特异性引物,采用RT-PCR方法扩增牛CD80、CD86目的片段
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本研究旨在建立一种共刺激分子CD80、CD86 SYBR GreenⅠ荧光定量PCR检测方法。根据GenBank中牛CD80、CD86的基因序列设计特异性引物,采用RT-PCR方法扩增牛CD80、CD86目的片段,将其克隆到pMD18-T载体上,提取阳性质粒进行测序鉴定,用得到的阳性重组质粒作为标准品,优化SYBR GreenⅠ荧光定量PCR反应条件,建立其标准曲线,对建立的方法进行特异性、重复性、敏感性试验。结果显示,所建立的方法特异性、稳定性良好,较敏感,可用于牛共刺激分子CD80、CD86的快速检测
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